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色譜柱有沒有壽命過短究竟是為什么

點擊次數:1434 發布時間:2019-06-11
    您在日常的實驗過程中用的色譜柱有沒有壽命過短的問題?不但實驗成本攀升,實驗效果都沒法。我們今天就為您解答有關色譜柱使用壽命的相關問題,助您的柱子“益壽延年”!
    為什么檢測該項目使用不同品牌的色譜柱,壽命均在100針左右?
    1)可能的原因是樣品組分吸附在色譜柱的前段。可能是由于樣品在流動相中的溶解度低而沉淀出來的,也有可能是吸附,或是樣品本身與填料表面發生微弱的不可預知的化學反應。樣品溶液本身的pH值在色譜柱的耐受臨界值附近,而且進樣體積較大(內徑4.6mm,上樣體積在50ul以上)對柱頭端的填料影響比較大,通常這樣的情況伴隨柱壓升。
    解決方法:選擇合適的樣品前處理技術,去除掉保留物質。使用保護柱,盡量選擇與分析柱同種填料,同種鍵合方法的保護柱。如果使用不同品牌的填料、裝填工藝的保護柱,在分離能力和保護分析柱方面可能得不到較好的效果。也不要使用更大粒徑的保護柱,更大粒徑或者裝填較差的保護柱會因為它的峰展寬作用而導致分離能力下降。
    2)鍵合相脫落變性。色譜條件多方作用導致壽命短,這是目前的色譜技術不能解決的,一般情況下小基團鍵合相更容易被水解而脫落。流動相中鹽濃度越,越容易引起水解。這種情況下,就只能重開發色譜條件。
    為什么該品牌的色譜柱一直好,就這一支壽命異常短?
    確定一下使用頻率、沖洗頻率、流動相的更換頻率、流動相的試劑品牌、純度等是否和之前一樣,如果有更換,那壽命有差異是正常現象。如果都與之前相當,那需要檢查這支色譜柱是否受過劇烈震蕩,比如:不小心摔過,或者運輸過程中受過劇烈震蕩,建議與廠家的技術人員溝通。
    為什么使用該品牌的支色譜柱用于方法建立時壽命長,方法建立后,開始進行方法驗證時,卻覺得壽命短?
    這種情況的發生,的原因是,前期建立方法時,并不是連續做項目,而是不停地更換流動相。這就意味著色譜柱的沖洗頻率比較,而更換的流動相的清潔度也是比較好的。建立方法的時候難連續進樣多次,有時候甚至一周才做一次項目,這樣就會產生支柱子使用時間更久的錯覺。而方法建立后,做方法驗證,流動相固定下來,就會一次性配置較大體積的流動相,這樣流動相較易變質,有時肉眼不能直接分辨。而且會連續多次過夜進樣,這樣對色譜柱的沖洗也不是及時。這些都是可能導致色譜柱壽命變短的因素。

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