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外標法檢測樣品中柚皮苷含量

點擊次數:3093 發布時間:2013-05-24

一、實驗方法

Cometro液相色譜系統;

色譜柱:Comasil C18 250*4.6mm5μm

流動相:甲醇-=40:60

紫外檢測器波長283nm

流速:1.0ml/min

樣品:柚皮苷對照品19.68μg/ml,樣品;

進樣量:對照品分別進樣2.5μl4μl5μl6μl7.5μl5次,樣品進樣5μl,使樣品與標準品5:1混合再進樣5μl,考察線性相關性,保留時間重現性,峰面積重現性,回收率。

二、實驗結果與分析

1對照品5μl

Channel A Results

Name

Retention Time

Area

Theoretical plates (USP)

Resolution (USP)

Asymmetry

柚皮苷

18.477

89103

8137

0.00000

1.09209

 

附進樣量,保留時間,峰面積關系表:

進樣量/μl

保留時間/min

峰面積/mV*min

2.5

18.386

42387

4

18.377

71244

5

18.477

89103

6

18.539

106504

7.5

18.501

134769

 

 

2樣品5μl

 

Channel A Results

Name

Retention Time

Area

Theoretical plates (USP)

Resolution (USP)

Asymmetry

柚皮苷

19.497

128002

8087

5.22515

1.05546

 

3樣品與標準5:1混合后進樣5μl

 

Channel A Results

Name

Retention Time

Area

Theoretical plates (USP)

Resolution (USP)

Asymmetry

柚皮苷

18.535

120336

7828

2.87114

1.03257

 

 

三、結果運算

1保留時間重現性考察

保留時間

18.386

18.377

18.477

18.539

18.501

RSD

0.3747%

 

2峰面積重現性考察

峰面積

89103

89105

88953

RSD

0.0979%

 

3線性相關性考察及樣品含量計算

以進樣量為橫坐標,峰面積為縱坐標,得線性方程:

由此可算出樣品含柚皮苷28.08μg/ml

4回收率考察:

根據上面線性方程可算出混合后樣品含柚皮苷26.43μg/ml而實際真值是26.68μg/ml,因此得回收率為99.06%

四、綜述

此四項考察綜合考察了檢測器的吸收穩定性,泵的流量性,進樣、進樣針的性,Comasil色譜柱的性。

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